以定量磷酸化蛋白質體學探討鋅指蛋白ZNF322A在人類肺癌A549細胞中的調控路徑

陳瑋庭

doi:10.6342/NTU.2015.00486

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以定量磷酸化蛋白质体学探讨锌指蛋白ZNF322A在人类肺癌A549细胞中的调控路径

Quantitative Phosphoproteomic Analysis Reveals the Regulatory Pathways of ZNF322A in Human Lung Adenocarcinoma A549 Cells

陈玮庭 , 硕士　　导师：阮雪芬　　

繁体中文 DOI： 10.6342/NTU.2015.00486

锌指蛋白；致癌基因；磷酸化蛋白质体学；羟基酸修正金属氧化物层析；自噬作用； Zinc-finger protein ； oncogene ； phosphoproteome ； HAMMOC ； autophagy

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ZNF322A is a transcription factor and belongs to the krüppel C2H2-type zinc-finger protein family. Recently, ZNF322A was reported as a potential oncogene in lung cancer patients and is critical for tumorigenesis. However, ZNF322A-mediated downstream signaling pathways in lung cancer cells remain unclear. Using hydroxy acid-modified metal oxide chromatography (HAMMOC) and nanoscale liquid chromatography–tandem MS (nanoLC-MS/MS), we examined protein phosphorylation induced by ZNF322A signaling in lung cancer A549 cells. We identified 4501 phosphorylation sites in 1309 phosphoproteins. Among these phosphosites, 443 were significantly changed in response to ZNF322A silencing. Using bioinformatics approaches including functional enrichments, network analysis and phosphorylation motif analysis, we highlighted a previously unidentified ZNF322A-mTOR signaling pathway and autophagic process. On the other hand, we demonstrated that ZNF322A plays an important role in cancer progression such as cytoskeleton regulation and tumor formation-associated process. This study not only gives new information about the molecular regulation by ZNF322A at post-translational level, but also provides a resource for the study of lung cancer therapy.

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