鑑定絲氨酸269磷酸化的第二型水通道蛋白質PDZ Motif和Sipa1l1 Domain之交互作用

劉劭萱

doi:10.6342/NTU201603085

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监定丝氨酸269磷酸化的第二型水通道蛋白质PDZ Motif和Sipa1l1 Domain之交互作用

Characterization of the Interaction between Serine 269 Phosphorylated Aquaporin-2 PDZ Motif and Sipa1l1 Domain

刘劭萱 , 硕士　　导师：余明俊　　

英文 DOI： 10.6342/NTU201603085

细胞顶膜；第二型水通道蛋白质serine 269 磷酸化； PDZ domain ； apical plasma membrane ； AQP2 serine 269 phosphorylation ； PDZ domain

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摘要 │ 参考文献 (29) │ 国际计量

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Vasopressin regulates the amount of the water channel protein aquaporin-2 (AQP2) in the apical plasma membrane via enhancing exocytosis and/or reducing endocytosis of AQP2-containing vesicles to and from the apical plasma membrane of the kidney collecting duct cells. Previous studies suggest that vasopressin induces AQP2 phosphorylation at serine 269 (S269), which enhances retention of AQP2 in the apical plasma membrane. We previously identified Sipa1l1, a PDZ domain-containing protein that regulates apical retention of serine 269-phosphorylated AQP2. Sipa1l1 reduces its interaction with the serine 269 phosphorylated AQP2 PDZ motif. To directly measure this PDZ interaction, we expressed and purified the Sipa1l1 PDZ domain with fusion tags glutathione-S-transferase, thioredoxin, 6x His, and maltose binding protein. Surface plasmon resonance binding experiments showed weaker binding of the serine 269 phosphorylated AQP2 peptide to the Sipa1l1 PDZ compared with the serine 269 non-phosphorylated AQP2 peptide. Models of the Sipa1l1 PDZ domain-AQP2 PDZ motif complex showed phosphorylation at serine 269 of the AQP2 PDZ domain reduces its interaction with the Sipa1l1 PDZ domain.

参考文献 ( 29 ) 〈TOP〉

1. Nielsen, S., et al., Cellular and subcellular immunolocalization of vasopressin-regulated water channel in rat kidney. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1993. 90(24): p. 11663-11667.
连结：
2. Pisitkun, T., et al., Akt and ERK1/2 pathways are components of the vasopressin signaling network in rat native IMCD. American Journal of Physiology - Renal Physiology, 2008. 295(4): p. F1030-F1043.
连结：
3. Star, R.A., et al., Calcium and cyclic adenosine monophosphate as second messengers for vasopressin in the rat inner medullary collecting duct. Journal of Clinical Investigation, 1988. 81(6): p. 1879-1888.
连结：
4. Katsura, T., et al., Protein kinase A phosphorylation is involved in regulated exocytosis of aquaporin-2 in transfected LLC-PK1 cells. American Journal of Physiology - Renal Physiology, 1997. 272(6): p. F817-F822.
连结：
5. Fushimi, K., S. Sasaki, and F. Marumo, Phosphorylation of Serine 256 Is Required for cAMP-dependent Regulatory Exocytosis of the Aquaporin-2 Water Channel. Journal of Biological Chemistry, 1997. 272(23): p. 14800-14804.
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